目的:探讨三氧化二砷(As2O3)抑制HL-60细胞端粒酶hTERT表达的分子机制。方法:构建含有hTERT启动子不同片段的荧光素酶基因表达载体,转染HL-60细胞,分别在有无As2O3作用下检测各组荧光素酶活性变化,间接反映As2O3对hTERT启动子不同片段活性的影响。结果:在As2O3作用下,含有hTERT启动子不同片段的荧光素酶基因表达载体的荧光素酶活性均下降(P0.05～P0.01)。结论:As2O3对HL-60细胞端粒酶hTERT启动子活性具有抑制作用。

目的: 构建人载脂蛋白M (APoM)野生型和突变型原核表达载体PGEX-KG-APoM及真核表达载体PcDNA3.1(+)-APoM。方法: Trizol法抽提HePG2细胞总RNA,RT-PCR扩增APoM全长基因,将基因片断重组到PMD18-T质粒中构建PMD18-T-APoM重组质粒载体,转化到大肠埃希菌JM109后筛选阳性克隆,提取质粒酶切和测序鉴定。采用Sited-directedMutagenesis定点诱变试剂盒对APoM基因进行体外定点诱变,DNA测序鉴定定点诱变成功与否。用双酶切方法分别将APoM野生型和突变型基因定向连接到原核表达载体PGEX-KG和真核表达载体PcDNA3.1(+)中,构建野生型和突变型PGEX-KGAPoM重组体和PcDNA3.1(+)-APoM重组体,分别转化到大肠埃希菌DH5α内,提取质粒酶切鉴定和测序鉴定。结果: 成功克隆了APoM并构建了野生型和突变型原核表达载体和真核表达载体。结论: 通过RT-PCR,定点诱变及基因重组技术成功构建野生型和突变型重组表达质粒PGEX-KG-APoM和PcDNA3.1(+)-APoM,为进一步研究APoM的功能奠定了基础。

目的探讨中性粒细胞淋巴细胞比值（neutrophil to lymphocyte ratio，NLR）、血小板淋巴细胞比值（platelet to lymphpcyte ratio，PLR）、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）和甲胎蛋白（alpha fetal protein，AFP）单独与联合检测在原发性肝癌辅助诊断中的临床应用价值。方法对95例肝癌病人、90例肝硬化病人及同期100名健康体检者进行血常规、血清CEA和AFP检测，并利用ROC曲线分析NLR、PLR、CEA、AFP单独和联合检测对原发性肝癌的辅助诊断价值。结果原发性肝癌组NLR、PRL、CEA和AFP水平均高于肝硬化组和对照组，肝硬化组NLR、PRL、CEA和AFP水平也高于对照组，差异均具有统计学意义（P < 0.05~P < 0.01）。NLR、PRL、CEA和AFP单独及联合用于原发性肝癌辅助诊断的ROC曲线下面积分别为0.827、0.602、0.816、0.942、0.983；灵敏度分别为81.2%、67.2%、78.6%、92.5%、96.7%；特异度分别为71.3%、64.5%、73.4%、82.3%、81.2%。NLR、PRL、CEA和AFP单独及联合用于原发性肝癌鉴别诊断的ROC曲线下面积分别为0.633、0.701、0.505、0.717、0.761；灵敏度分别为61.3%、68.7%、51.2%、70.6%、78.3%；特异度分别为68.4%、72.6%、56.7%、68.7%、73.2%。结论NLR、PLR、CEA和AFP联合诊断试验可以提高原发性肝癌辅助诊断的灵敏度，对肝硬化的鉴别诊断也具有一定临床应用价值。

目的：检测皖北地区耳聋病人常见的基因突变位点，阐明该地区耳聋的遗传病因学。方法：采集189例耳聋病人临床信息及外周静脉血2 mL，对GJB2、SLC26A4、线粒体（mt）DNA12SrRNA及GJB3 4种常见基因的9个突变位点进行检测，结合临床资料进行相关性分析。结果：189例病人中，其他疾病引起的耳聋27例，突发性耳聋29例，均未检测到突变位点；非综合征性耳聋（NSHL）病人133例，其中检测到基因突变55例（41.35%）。常见的突变基因依次为：GJB2（24.81%）、SLC26A4（12.03%）和mtDNA12SrRNA（6.02%）。常见的突变位点为235delC、IVS7-2A>G和1555A>G，其等位基因的突变率分别为35.45%、20.00%和11.82%。结论：皖北地区NSHL病人中GJB2突变比例最高，为最常见的突变基因，其最常见的突变位点为235delC。